顯微圖像分析儀的校準(zhǔn)是一個(gè)復(fù)雜而細(xì)致的過程，涉及多個(gè)方面。通過嚴(yán)格的校準(zhǔn)流程和精確的操作，可以確保顯微圖像分析儀的準(zhǔn)確性和可靠性，從而為科研和臨床應(yīng)用提供高質(zhì)量的圖像分析結(jié)果。
顯微圖像分析儀的校準(zhǔn)方式主要包括以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟：
1. 環(huán)境條件準(zhǔn)備：確保校準(zhǔn)環(huán)境的溫度、濕度和光照條件穩(wěn)定且適宜，通常要求環(huán)境溫度為22℃±4℃，相對濕度≤70%，供電電源為(220±22)V，電源頻率(50±1)Hz，且儀器應(yīng)安放在穩(wěn)壓的工作臺上，工作室內(nèi)潔凈，無揮發(fā)性有機(jī)溶劑及腐蝕性氣體，無強(qiáng)磁場、靜電等干擾。
2. 外觀檢查：查看顯微圖像分析儀的光源是否正常，有無影響正常工作的機(jī)械損傷，各調(diào)節(jié)器或按鈕是否工作正常，分析儀自帶的蓋玻片、校正板是否干凈整潔。
3. 光學(xué)系統(tǒng)校準(zhǔn)
- 清晰度與分辨率調(diào)整：使用標(biāo)準(zhǔn)測試樣本，如分辨率測試卡或標(biāo)準(zhǔn)顯微圖像，來評估設(shè)備的光學(xué)系統(tǒng)性能。通過調(diào)整鏡頭的焦距、光圈等參數(shù)，以及優(yōu)化光路系統(tǒng)的配置，確保設(shè)備在捕捉圖像時(shí)具有足夠的清晰度和分辨率。
- 場曲校準(zhǔn)：安裝物鏡，將0.01mm標(biāo)準(zhǔn)測微尺放置在工作臺上并壓緊，旋轉(zhuǎn)調(diào)焦旋鈕，先使視場中心清晰成像，再調(diào)整至邊緣清晰，觀察千分表，記錄偏移量作為場曲誤差，不同倍數(shù)物鏡有相應(yīng)的場曲誤差指標(biāo)，如10X<0.2mm、100X<0.04mm等。
- 放大倍數(shù)校準(zhǔn)：裝上標(biāo)準(zhǔn)目鏡和被檢物鏡，放置標(biāo)準(zhǔn)測微尺，觀察測微尺與目鏡中的分劃板是否相符，計(jì)算偏移量作為放大倍數(shù)誤差，一般要求誤差不大于5%。
4. 計(jì)算機(jī)圖像處理系統(tǒng)校準(zhǔn)：使用一系列已知參數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)圖像，包括不同尺寸、形狀和顏色的物體圖像，對設(shè)備進(jìn)行測試。通過調(diào)整圖像采集、處理、分析和輸出等環(huán)節(jié)的算法和參數(shù)，優(yōu)化設(shè)備的測量性能，減少誤差和偏差，以提高測量精度和穩(wěn)定性。
5. 灰度特性校準(zhǔn)
- 灰度重復(fù)性校準(zhǔn)：待儀器光源穩(wěn)定后，采集灰度等級為K的輸出空白圖像，每隔2min采集1次，連續(xù)采集5次后，按公式計(jì)算儀器的灰度重復(fù)性ΔG，其值應(yīng)不大于0.5%。
- 灰度均勻性校準(zhǔn)：同樣在儀器光源穩(wěn)定后，采集灰度等級K的空白圖像，選取M×N個(gè)采樣區(qū)域的測量值gi，按公式計(jì)算儀器的灰度均勻性U，要求不大于0.5%。
6. 穩(wěn)定性與重復(fù)性測試：在不同時(shí)間段和不同條件下，對同一樣本進(jìn)行多次測量，記錄測量結(jié)果并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和比較，以評估設(shè)備的穩(wěn)定性和重復(fù)性。同時(shí)，在校準(zhǔn)過程中需保持設(shè)備穩(wěn)定，避免振動(dòng)或溫度變化等因素對校準(zhǔn)結(jié)果的影響。
7. 校準(zhǔn)記錄與驗(yàn)證：詳細(xì)記錄校準(zhǔn)過程中的各項(xiàng)參數(shù)和結(jié)果，建立校準(zhǔn)檔案。使用已知參數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行驗(yàn)證測試，確保顯微鏡的測量和分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
